生物樣品的前處理技術(shù)--機械法進行細胞破碎
機械法主要是通過機械切力的作用使組織細胞破碎,有以下幾種裝置和方法可用于組織細胞的破碎。
①高速組織搗碎機? ?由調(diào)速器、支架、馬達、帶桿刀葉、有機玻璃管(筒口加蓋)等部分組成,操作時將樣品配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)(約占1/3體積),固定筒上的蓋子,將調(diào)速器撥至最慢處,開動馬達后逐步加速至所需速度,一般市售商品轉(zhuǎn)速最高可達20000r/min。高速組織搗碎機適宜于動物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子、柔嫩的葉和菜籽材料的破碎。
②玻璃勻漿器? ? 由一個內(nèi)壁經(jīng)過磨砂處理的玻璃管和一根一端為球狀(表面經(jīng)過磨砂)的桿組成。操作時,先把絞碎的組織置于管內(nèi),再套入研磨桿,手工來回研磨,或把桿裝在電動攪拌器上,用手握住玻璃管上下移動,即可將細胞研碎。勻漿器的內(nèi)桿球體與管壁之間一般只有十分之幾毫米,細胞破碎程度比高速組織搗碎機高,機械切力對生物大分子破壞較少。制造勻漿器的材料除玻璃外,也可是不銹鋼、硬質(zhì)塑料等。
③研磨? ? 常用的有研缽和研磨。細菌及植物材料應用較多,加入少量的玻璃砂效果更好。
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